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組織培養中汙染的主要類型、特點和控制方法有哪些?

組織培養中汙染的主要類型、特點和控制方法有哪些?組織培養中的汙染主要是細菌汙染和真菌汙染。細菌汙染的主要特征是在材料附近的培養基中出現混濁和雲狀痕跡。壹般可在接種後1~2天發現。真菌汙染的特征是培養瓶中的白色、黑色或綠色菌絲。通常在3~10天可以找到。如果控制的話,無非就是組織培養過程中嚴格的無菌條件和無菌操作。總的來說,組織培養汙染不外乎以下原因:1,培養基滅菌不徹底。2.外植體的滅菌不完全。3、接種操作不規範,接種器械消毒不徹底。4、培養環境不幹凈。所以註意以上幾點,應該是可以改善的。

植物組織培養中微生物汙染的主要途徑有哪些?防止植物組織培養汙染的主要措施有:

(1)改善環境條件。接種室和培養室應定期消毒凈化,接種前工作臺或接種箱應開啟30min以上。培養室的相對濕度應控制在70%左右。相對濕度過高時,可用除濕機除濕。

(2)接種人員的培訓非常重要,應嚴格執行無菌操作。接種所需的工具在使用前必須嚴格消毒。在潔凈工作臺的操作區,不要放太多要用的材料,以免氣流受阻。還要定期檢查潔凈工作臺的工作質量[8]。

(3)嚴格檢查接種材料。消除被真菌和細菌汙染的接種材料。

(4)經常檢查滅菌器的滅菌質量,發現問題立即修復。消毒鍋的壓力表降到零後不能馬上拿出來。由於冷熱空氣作用產生的負壓效應,使外界環境中的冷空氣被吸回已滅菌的培養瓶中,造成真菌汙染。為避免這種現象,應在鍋稍微冷卻後,將滅菌後的培養瓶從鍋內取出[9]。

(5)檢查培養容器是否有問題。培養容器通常用塑料蓋、橡皮塞、棉塞、薄膜等密封。塑料蓋用久了容易老化,密封性差,也會造成汙染。林升等人配制了壹種“4號消毒液”對瓶口進行消毒,可將培養基汙染率控制在0.3%以下[10]。

傳代培養中汙染的預防和控制

初期獲得的無菌材料理論上是無菌的,但在後期或繼代培養中也會被汙染,除了操作不慎,還可能被培養室內蟎蟲傳播的真菌汙染。這種汙染可以從兩個方面來預防:(1)擴大再生產的時候要有壹個合理的方案。獲得原始無菌培養物後,其中壹部分要作為“原種”保存,批量繁殖,復檢後再提供批量生產。(2)可以在培養基中加入抗菌劑來防止[3]。徐萬芳等人在金線蓮組織培養中使用多菌靈抑菌促生,效果明顯優於甲霜靈、甲基硫菌靈及其混合物。生長在含多菌靈培養基中的金線蓮未被微生物汙染,殺菌率為100%,無白化苗,苗健壯[11]。

植物內生細菌具有很深的潛力,不能通過表面消毒來消除。有時,在外植體的初始培養中,包括前幾代的繼代培養中,在培養基上不容易被肉眼檢測到。隨著繼代次數的增加,細菌量逐漸積累發展,然後出現在培養基上[12]。黃小容等人認為植物組織培養中細菌汙染的原因是休眠細菌孢子萌發的結果[13]。通過在培養基中添加抗生素、培養莖尖和降低PH值,可以預防和減少細菌等內生細菌的汙染。

王壹菲等人在彩色芋頭快繁至第4 ~ 5代時添加200mg/L青黴素GK,可有效抑制內生菌的生長而不影響繁殖系數[14]。在長春藤的組織培養中,翟建忠等人用鏈黴素抑制內生細菌黃單胞菌。優於慶大黴素和頭孢唑林鈉。在培養基中同時使用這兩種抗生素有利於防止細菌產生耐藥性,長期控制細菌汙染的發展。然而,鏈黴素劑量的增加會對植物產生毒性[15]。

培養基中添加抗菌劑並選擇合適的濃度是非常重要的。低濃度會效果差,高濃度容易對植物造成毒害,影響增殖或使培養物變黑,造成死苗和白化苗。兩種或兩種以上抗生素聯合使用,可預防和控制細菌的耐藥性。抗生素和多菌靈壹般不耐高溫,需要過濾滅菌,生產中不方便添加。苯甲酸鈉、山梨酸鉀、丙酸鈉是食品中常用的防腐劑,耐高溫高壓,便於在組織培養生產中使用。

植物材料中的內生菌也可以通過重復莖尖培養來去除。由於病原菌在植物體內的分布是不均勻的,莖尖分生組織通過維管束傳遞是無菌的,通過反復莖尖培養,無論是內生細菌還是病毒都可以被去除。

除歐文氏菌外,大多數細菌在培養基PH小於4.5時不能生長。在紫苑、鳶尾、薔薇的組織培養中,將培養基的PH值從5.8調整到3.9 ~ 4.3,可以防止大量的細菌汙染[7]。胡青等在低PH值(3.10)的水中培養,並改善容器的通風條件,可使細菌汙染嚴重的綠巨人塊正常增殖,對單株生長無害。生根苗比例高於常規固體培養,基本解決了細菌汙染嚴重後的產菌問題[16]。

對於被汙染的培養物,有時會因為植物材料的稀少或反復出現而耗費大量時間,較大的植株也可以切割消毒後再次接種。李等分別用400萬或600萬單位/L青黴素無菌水溶液浸泡銀白楊組織培養中的細菌汙染苗60min或40min,可有效防止組織培養中的細菌汙染。處理後的幼苗繼代培養時,沒有反復的細菌汙染,幼苗分化能力強。生根時根系發達,移栽成活率高[17]。Mars等人證明,如果繼代培養中只有真菌汙染,可在3%多菌靈無菌溶液中浸泡0.5h以上,用無菌水沖洗後接種或不經無菌水沖洗直接接種即可消除真菌汙染。如果細菌和細菌、真菌同時汙染,可以用HgCl2消毒法重新建立無菌育苗體系,將汙染的幼苗切成長莖段作為外植體,用自來水沖洗0.5h,然後在超凈工作臺上用乙醇和HgCl2短時間處理[18]。

4.減少培養基中的有機成分

培養基中有機物的存在是造成汙染的重要原因,去除有機物也是減少汙染的壹種方法。在阿月渾子的組織培養中,宋鳳輝等人去除了有機成分(如VB1、VB6、煙酸等。)在培養基中,經2 ~ 3代培養後,能抑制細菌的生長,對叢生芽的生長和增殖無影響。原因是這些都是某些細菌生長的必要物質。去除這些有機物後,細菌無法生長發育,死亡逐漸減少[19]。日本Toyuki Kozai教授首創的植物無糖組培快繁技術,完全去除培養基中的有機成分,輸入可控量的CO2氣體作為碳源,通過控制環境因子促進植物的光合作用速率,使植物由異養轉化為自養,使植物生長良好,汙染率明顯降低[20]。由於去除了糖分,組培苗的培養由玻璃瓶變成了箱式容器,整個培養室也可以作為培養容器,甚至不需要嚴格的無菌操作,汙染也很小。這項技術至少在很多植物組培苗的生根促進階段是非常成功的。

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口罩的粉塵阻擋效率是基於其對微細粉塵的阻擋效率,尤其是對2.5微米以下的可吸入粉塵的阻擋效率。因為這種粒徑的粉塵可以直接進入肺泡,對人體健康的影響最大。紗布口罩,其防塵原理是機械過濾,即當灰塵與紗布碰撞時,壹些大顆粒的灰塵通過層層屏障被阻擋在砂布中。對於壹些細小的粉塵,尤其是小於2.5微米的粉塵,會通過紗布的網眼進入呼吸系統。防塵口罩,它的過濾材料是由活性炭纖維氈墊或無紡布組成,那些小於2.5微米的可吸入粉塵通過這種過濾材料。

組織培養中滅菌的主要方法有哪些?1.濕熱滅菌法通過加壓提高蒸汽溫度,高壓蒸汽滅菌穿透力強,溫度高,滅菌效果最好。註意事項:1。完全排除高壓釜中的冷空氣。有冷空氣時,同樣表壓下達到的溫度會更低,排出的冷空氣越少,溫度就越低。在高壓蒸汽中,為了保證達到規定的溫度,必須完全排除冷空氣。否則,雖然壓力達到了,溫度沒有達到規定的要求,滅菌也不會徹底。2.紫外線殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多。殺菌效果在壹定程度上受到限制。紫外線的殺菌效果與紫外線強度、照射時間、溫度和濕度等因素有關。我國規定紫外線燈在1m的照射強度距離不小於70μw/cm2。壹般紫外燈使用超過100h就要更換了。表面有灰塵,降低殺菌效果。紫外線燈的殺菌溫度為20~40℃。相對濕度為40%~60%。3.幹熱滅菌法。灼燒和火焰滅菌:灼燒主要用於工具滅菌,在火焰上灼燒可以徹底滅菌。火焰滅菌通常用於無菌操作。試管口、玻璃瓶口、矽膠塞等。多次反復通過火焰,火焰對噴嘴進行消毒,防止噴嘴被汙染。作為無菌操作中的壹種輔助滅菌方法。4.幹烘滅菌:利用熱輻射和幹熱空氣進行滅菌。通常,待滅菌的物品,例如金屬、玻璃和陶瓷產品,可以在包裝後在烘箱中滅菌。通常加熱至160℃並保持該溫度2小時,可使它們完全滅菌。但不能超過170℃,玻璃量具容易變形。如果溫度下降過快,很容易突然降溫。

在植物組織培養中,造成組培材料汙染的因素有哪些?

培養基滅菌不完全

容器的不完全滅菌

不規則操作

接種後沒有密封好。

植物組織培養中哪些因素會導致汙染?汙染原因1.1。

外植體

(1)年齡、類型和大小。成年植物攜帶更多的細菌;生理年齡大的材料攜帶細菌多;雜菌和內生菌多的外生植物和有病蟲害的植物容易被汙染;室外生長的材料中有很多細菌;表面有土壤的物質和地下器官都攜帶較多的細菌;表面積大的材料比表面積小的材料攜帶的細菌多[1-2]。

②取樣的時間和地點。真菌在雨季茁壯成長,此時物質中有很多細菌;陽光最強的時候,紫外線更強,殺菌效果好。此時,材料攜帶的細菌較少。不幹凈、長勢差的部位選菌多的材料[1]。

③殺菌效果。外植體的滅菌是組織培養的關鍵,滅菌效果直接決定了組織培養的成敗。滅菌方法和滅菌劑處理不當導致滅菌效果差,使外植體帶菌。1.2

組織培養過程中,各技術環節操作不規範①培養基。用長菌母液配制培養基;培養

高pH值和新的有機成分會導致細菌汙染。培養基分裝後未及時密封或密封後未立即滅菌;培養容器的容器口未密封,導致已滅菌的細菌和真菌孢子再次進入培養容器,汙染培養基;密封用的塑料蓋和密封膜在熒光燈長時間照射下容易老化開裂,導致密封性能差,使用不慎可能導致培養基汙染;橡皮筋長時間在熒光燈照射下也容易松動斷裂,雜菌可能會趁機進入培養容器;滅菌方法不當導致介質汙染;滅菌時間過短導致培養基滅菌不徹底;滅菌時間到了馬上打開滅菌鍋,導致容器內壓力差過大,可能導致外界雜菌被吸回容器內[1];過濾更多的溶液後,膜過濾效果差,使得過濾後的溶液有細菌,加入培養基後造成汙染。

②培養容器和接種器具。培養容器不幹凈;培養容器被汙染後消毒不徹底,導致再次使用時被汙染;高壓滅菌器或烘箱內的培養容器和接種器具過滿,影響滅菌效果;培養容器和接種器具滅菌時間過短,導致滅菌不徹底;滅菌後立即打開高壓滅菌器或烤箱。強烈的冷熱對流會使冷空氣被吸入包裹層,再次造成汙染和細菌[1]。

③接種人員。指甲太長;手不幹凈;衣服和頭發上有很多灰塵,接種時不要換拖鞋、接種服、帽子和口罩;不慎將汙染的培養物帶入潔凈工作臺,轉移後再次汙染;培養容器中接種的培養物太多;超凈工作臺上過多過高的物品阻擋了氣流,導致殺菌效果不佳;接種疫苗時說話或咳嗽會撥出大量細菌;操作時手在工作臺之外;觸摸培養容器的邊緣,將手放在器具和接種器具上方,使微生物落入培養容器中;當培養容器的塞子、蓋子或密封膜打開時,空氣進入並帶來灰塵;接種過程中,器械未經消毒被手或帶菌材料汙染,材料重復使用後被汙染;潔凈工作臺下風向沒有操作導致真菌隨風落入容器內[3];離開clean bench後,我立即繼續接種。我把培養基、儀器等物品拿到潔凈的工作臺接種,帶了灰塵,隨風飄到器皿裏。衣物、帽子、口罩、拖鞋長期穿戴後比較臟,表面有大量灰塵,不清洗反復穿戴後造成汙染。

④接種室和培養室。人員進出導致接種室、培養室空氣中有大量細菌、真菌,尤其是接種時非工作人員進出;接種室設計不合理,導致室內灰塵、細菌超標;潔凈工作臺放置在灰塵過多的地方,過濾裝置因使用時間過長、維護不當而失效;組培室、接種室門窗關不嚴,蒼蠅飛進來,有利於雜菌傳播;養殖室大面積容易被汙染,室內溫度高,空氣濕度大,菌類繁殖旺盛,也會加重汙染。

植物組織培養中哪些因素會導致汙染?如何防止98汙染(中文單詞)編輯

汙染,壹個中文單詞,指的是得到骯臟或有害的物質或受到不良思想的影響。

中文名汙染mbth汙染拼寫w Sr m:n註音ㄨㄖㄢˇ同義詞渾濁汙染反義詞。

1.【汙染;被***附耳;玷汙;弄臟:用汙垢或有害物質弄臟。

輻射汙染了整個地區。

2.【民意測驗】指受壞思想的影響

思想被汙染了

3.【***耳朵;涉及]:指誣陷或牽連[1]

在植物組織培養中,哪些因素會導致汙染?壹是外植體處理不當,造成汙染。

二是汙染培養皿處理不當,造成二次汙染

三是鑷子、手術刀等工具被汙染,培養基未滅菌,工作臺未滅菌。

四是接種時火焰瓶口附近沒有落菌,操作不熟練增加汙染率。

第五,實驗人員噪音大,工作強度大。

不及物動詞實驗室中的大規模汙染

治理大氣汙染的方法有哪些及其特點?大氣汙染治理可分為大氣除塵、除雜、除臭和消毒。

除塵包括布袋除塵、靜電除塵和噴淋。

除雜就是廢氣處理,比如脫硫,包括濕法、半幹法、幹法。

除臭包括生物除臭、生物濾塔除臭、活性炭除臭等。

汽車噪聲汙染的控制方法有哪些?好像沒辦法看妳是不是在那個角度。如果是在車上,只能換排氣管列表,效果不壹定好。