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怎樣進行組織培養?

(1)器具的消毒。組培前玻璃器皿等要用洗衣粉刷洗幹凈備用。接種室和超凈工作臺用70%酒精擦洗,並用紫外光照射。其他用具也要進行高溫消毒。

(2)培養材料的采集。組培所用的植物材料可采用根、莖、葉、花、芽及種子的子葉、胚軸的壹部分,有時也可利用花粉或花藥。通常應取初生幼嫩的材料,這些材料在移入培養基時都必須保持鮮嫩狀態,否則組培將會失敗。

(3)培養材料的消毒。先將采集來的材料用自來水沖洗幹凈,再用蒸餾水沖洗2~3遍,然後用無菌紗布將材料上的水分吸幹,切成小塊,放入70%酒精中浸泡15~30秒,再用30%漂白粉澄清液浸泡20分鐘消毒,最後用無菌水沖洗3~5遍。

(4)制備外植體。將上述經過滅菌的材料,用在火焰上消過毒的刀、剪、鑷,在消毒濾紙上剝去芽的鱗片,嫩枝的外皮和種皮胚乳等,然後切成長0.2~0.5厘米的小片(這些小片就是外植體)。在操作過程中,嚴禁用手觸動這些材料。

(5)接種培養。在無菌條件下將切好的外植體立即接種在培養基上。接種後所用試管和三角瓶都要用無菌藥棉封口,放培養室培養架上培養。每天用日光燈照12~16小時。保持在25℃±20℃。也可采用變溫培養,夜間溫度略低於白天。